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細胞培養(yǎng)過程中常見問題及其解答

發(fā)布日期: 2020-04-29
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1.如何選用培養(yǎng)基?

培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊琈EM做粘附細胞培養(yǎng) 、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng),各種目的無血清培養(yǎng)的是AIM V培養(yǎng)基(SFM)。

2.為什么要熱滅活血清?

加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在進行免疫學 研究、培養(yǎng)ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。

3.L-谷氨酰胺在細胞培養(yǎng) 中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?

L-谷氨酰胺在細胞培養(yǎng) 時是重要的。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有終確定。L-谷氨酰胺的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。

4.GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定 ?

GlutaMAX-I二肽是L-谷氨酰胺的衍生物,將其不穩(wěn)定的α-氨基用L-丙氨酸來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I二肽溶液有小的降解,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎*降解。

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